酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀測(cè)量波長(zhǎng)的設(shè)定以什么為標(biāo)準(zhǔn)

酶標(biāo)儀測(cè)量波長(zhǎng)的設(shè)定以什么為標(biāo)準(zhǔn)

酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀。是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的專用儀器又稱微孔板檢測(cè)器。可簡(jiǎn)單地分為半自動(dòng)和全自動(dòng)兩大類，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一個(gè)比色計(jì),即用比色法來進(jìn)行分析。 測(cè)定一般要求測(cè)試液的最終體積在250μL以下，用一般光電比色計(jì)無法完成測(cè)試，因此對(duì)酶標(biāo)儀中的光電比色計(jì)有特殊要求。

實(shí)驗(yàn)中波長(zhǎng)的選擇主要依賴于你要測(cè)的樣品。樣品在不同的波長(zhǎng)下，對(duì)光的吸收值也不同，但都有一個(gè)吸收峰，一般選擇吸收峰時(shí)的波長(zhǎng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。比如同樣是MTT法做細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)，就有使用490nm和570nm兩種波長(zhǎng)選擇，如果使用了DMSO作為試劑，在溶解后呈紫（紅）色，在490nm有最大吸收值；而對(duì)于SDS和酸化異丙醇，則選用570nm（655nm作為參考波長(zhǎng)）。
酶標(biāo)儀波長(zhǎng)設(shè)定還要看你用的是什么酶標(biāo)儀，如果是光柵式單色器（可以1nm步進(jìn)調(diào)節(jié)），就可以直接設(shè)定吸收峰的波長(zhǎng)；如果是濾光片式單色器，因?yàn)槭転V光片波長(zhǎng)限制，有時(shí)你就需要選接近使用波長(zhǎng)的濾光片，比如655nm，你就可能選用650nm的濾光片。